老鼠眼睛对光非常敏感,但却差不多是色盲，善于攀爬及游水。老鼠主要在黑暗处及夜间活动，但寻找食物或数量很多时日间亦能看见鼠影。沟鼠主要于水渠、垃圾房等地方出没；家鼠多于天花板、阁楼、地下室等地方活动；而小家鼠则藏匿于屋内隐蔽处如厨柜后、抽屉内、贮物室等地方。老鼠食性非常杂乱，无论谷物、米、花生、饼干以至香肠鱼肉等等均是它们的美食。而老鼠因长有两对生长快速的门牙，每年可长约13公分，所以老鼠要不停咬硬物以磨损门牙，否则门牙会过长及向后卷入，令它无法觅食而死亡，所以有老鼠之处很多东西如门框、屋顶、电线等均会被老鼠咬破并留下木屑。一些火警便是因老鼠咬烂电线短路而产生。
背部中央有一黑色条纹，从两耳之间一直延伸至尾基，少数地区的类型黑纹不明显或无此纹。腹毛灰白色。尾长相当于体长的
分布很广，平原、丘陵、山地、湖洼地去均有，以平原的农业区较多，有些草原、森林边缘和采伐迹地上也能见到。喜居于向阳、潮湿、近水处。在农业区内，多栖息于农田、田埂、提边、土丘、杂草丛及柴草垛中。在各种农田中，以稻、豆地鼠密度较高。大田埂鼠数一般多于小田埂，但如大田埂为粘性大的沟底土筑成时，由于土质坚硬打洞艰难，则情况相反。洞穴较表浅，构造简单，可分为两类；一类是栖居洞，有两个或两个以上的洞口（前、后洞或天洞），洞道膨大部分内有干草或豆叶等作成的窝巢；另一类是临时洞，只有一个洞口，内无窝巢。天气温暖或多雨季节，窝巢较浅；严寒季节，窝巢较深。
食性杂。以植物性食物为主，主要吃种子、植物的绿色部分及根、茎等，稻、麦、豆类、高粱、番薯皆所嗜食。食物随季节而异。秋、冬两季以种子为主要食物，佐以植物的根和茎。春季捕食昆虫和麦苗等。夏季食植物的绿色部分、瓜果及昆虫等。月的降雨量对秋季作物收成和黑线姬鼠数量的影响较大。主要在夜间活动，黄昏和清晨最为活跃，白天较差。不冬眠，春、秋两季较活动。随自然条件和食物来源而迁移。放水或大雨后田中积水时，向田埂集中。多雨季节，向地势较高处转移。夏季天气炎热，作物生长茂盛，隐蔽条件良好，且这时谷物尚未成熟，，田中食源少，又非主要繁殖季节，故多不挖洞筑巢，随食源而流动。入秋后，天气转寒，又值繁殖高峰季节，多筑巢以避寒和产仔，这时田埂、堤坝上的鼠洞明显增多。入冬后，田野食源缺少，加以洞中不存粮或存粮很少，故有的鼠迁至附近的晒场和草垛中，少数进入住室。开春转暖后，又返回田野。在水利工地，如未做好灭鼠、防鼠工作，鼠可进入工棚。据在安徽某些湖洼地区调查，黑线姬鼠的数量受降雨量和河水水位高低的影响，降雨量大，水位高时，鼠数量少，反之则多。老鼠长有一对不断生长的大门牙，所以小老鼠总是咬坏衣柜、木箱以不停地磨牙。
老鼠的长尾巴有很好的平衡作用，即使从五层楼上摔下也不会受伤。英国剑桥大学和史密斯克兰比彻姆大学的研究人员日前在《自然》杂志上发表文章说，由他们培育的一种转基因老鼠在比同类进食多得多的情况下，却总能保持"苗条轻盈的体态"，这一研究成果为给人类找到一种可以不限制食量的新型减肥药开辟了广阔前景，它将不同于以抑制食欲为机制的各类当代减肥药。科学家经研究发现，老鼠尤其爱看电视广告镜头，每每这个时候，老鼠特别兴奋，嘴里叫得特别欢，胡须也不停地摆动。负责该项研究的约翰·克拉彭博士介绍说，他们培育的老鼠可以在其肌肉细胞的线粒体内产生大量的一种叫做"解联藕蛋白质-3"的物质，这种物质可加速新陈代谢，同时把从食物中摄取的能量转化为热量散发出去，而不会转化成脂肪积聚在体内。因此这些老鼠想吃多少就吃多少，体重却比其他正常老鼠轻得多。实验表明，转基因老鼠在食量比正常老鼠多15%~54%的情况下，其脂肪组织却比正常老鼠要少44%~57%。克拉彭博士表示，在老鼠身上的这项研究成果使得研制能促进大量消耗热量而不只是单纯抑制食欲的人类减肥药品成为可能。但克拉彭博士同时指出，无论开发出什么新型减肥药品，调节饮食以及坚持不懈的体育锻炼都永远是减肥者的首选之路。1975年Hayes等报道，猫的饲料中若缺少牛磺酸，会导致其视网膜变性，长期缺乏，终至失明。猫以及夜行猫头鹰之所以要捕食老鼠，其主要原因是老鼠体内含有丰富的牛磺酸，多食可保持其锐利的视觉。
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